Students will be able to prepare microscopic preparates, including diagnostic staining, to determine on the morfology basis the main genuses of yeasts and micromycets. They will know how to interpret ENTEROtest and on the basis of thein own measurement they will be able to calculate the specific growth rate of model microorganisms. They will master the priciples of aseptic work and to prepare basic types of the growth media.

Studenti budou umět: připravit mikroskopický preparát včetně diagnostického barvení, určit na základě morfologie hlavní rody kvasinek a mikromycet. Dále budou umět vyhodnotit Enterotest a na základě svých měření spočítat růstovou rychlost modelového mikrooganismu. Budou ovládat zásady aseptické práce a přípravu základních typů růstových medií.

Z: Demnerová,K. Laboratorní cvičení z mikrobiologie Vysoká škola chemickotechnologická v Praze, 2001,8070804157

1. Safety rules in microbiological laboratory. Sterilization techniques. Preparation of sterile medium in cultivation flaks and test tubes.

2. Sterilization of pipettes test-tubes and other instruments Defined and komplex media. Inoculation techniques of bacteria and yeasts.

3. Optical microscopy of native and stained yeasts and bacteria. Gram staining of chosen bacterial representatives. Microscopy of different genuses of yeasts, types of their vegetative reproduction.

4. Isolation techniques of microoorganisms, streaking technice for isolation of two bacterial strains from the mixture. Vitality test of yeasts by methylen blue staining.

5. Use of Thoma chamber for enumeration of yeasts. Isolation of pure cultures from the mixture of two yeasts species.

6. Factors influencing bacterial growth:tempetrature, presence of organic dyes, UV irradiation, antibiotics. Continuation of the bacterial and yeasts izolation.

7. Measurement of the growth curve of bacteria (Escherichia coli), calculation of of the specific growth rate by measurement of culture optical density. Time of lag, generation time.

8. Microscopy of micromycets, preparation of native preparate. Comparison of typice representatives of molds(micromycets).

9. Detection of coliform bacteria in food samples. Isolation of bacteria - confirmation of species identity by chosen biochemici tests and by ENTERO-test.

10. Isolation of yeasts species: confirmation of identity by fermentative test and by morfology.

11. Summarization of the results of bacterial izolation. Confirmation of the presence of two bacterial strains.

12. Summarization of the results of yeasts izolation, evaluation of izolation methods.

13. Microscopical identification of anonymous micromycets strain. Confirmation of the presence of two yeasts strains.

14. Disposal of all used microbial cultures, closing test.

1. Bezpečnost práce v mikrobiologické laboratoři. Příprava sterilních baněk, zkumavek, pipet a ostatních nástrojů

2. Definovaná a komplexní media. Příprava a sterilizace různých typů kultivačních a diagnostických medií

3. Techniky inokulace vybraných typů bakterií a kvasinek. Světelná mikroskopie nativních a barvených preparátů bakterií a kvasinek. Gramovo barvení vybraných bakteriálních kmenů

4. Izolační techniky mikroorganismů.Čárkovací technika pro izolaci čistých kultur ze směsi dvou druhů bakterií.

5. Mikroskopie kvasinek - typy vegetativního dělení kvasinek. Vitální barvení kvasinek methylenovou modří. Techniky počítání kvasinek v počítací komůrce.

6. Pohlavní rozmnožování kvasinek - stanovení kopulačního typu

7. Faktory ovlivňující bakteriální růst. Experimenty ukazující účinek teploty, organických barviv, UV a antibiotik na růst a dělení mikroorganismů

8. Principy stanovení počtu živých bakterií v různých typech potravin.

9. Úvod k ISO normám. ISO normy pro stanovení mikroorganismů v potravinách

10. Identifikace izolovaných bakteriálních a kvasinkových kmenů. Biochemické testy izolátů.Použití ENTERO-testu k identifikaci izolátů

11. Základy morfologie mikro-mycet (plísně). Použití mikroskopu při klasifikaci jednotlivých rodů běžných plísní. Principy systému a identifikace plísní

12. Růstová křivka mikroorganismů. Výpočet růstové rychlosti z naměřených hodnot - kultivace E. coli v baňce, měření optické density. Stanovení růstové rychlosti, času lag fáze a generační doby.

13. Rychlé metody stanovení mikroorganismů

14. Likvidace žitých kultur a medií a mytí skla. Závěrečný test. Zhodnocení znalostí a výsledků práce. Zápočet.

none

žádné

Biochemistry I.

Biochemie I