The course focuses on antibody-antigen interaction aspects especially in terms of in vitro characterization, resulting in a wide variety of immunoassays. After understanding the functions of the immune system and the characteristics of the structure and properties of antigens and antibodies, including their interaction, methods of targeted antibody preparation for analyzes and the characteristics of immunochemical techniques will be described. In individual projects the students will study a selected type of immunochemical technique, principles and possibilities of use. The choice of topics will either be in line with the topic of the doctoral project, or with regard to the current state of research in this area. The results will be presented in the form of short presentation during the course.

Předmět je zaměřen na aspekty interakce protilátka antigen především z pohledu in vitro, s výstupem do charakterizace široké palety imunoanalytických metod. Po pochopení funkcí imunitního systému a charakteristik struktury a vlastností antigenů a protilátek včetně jejich interakce bude navázáno způsoby cílené přípravy protilátek pro analytiku a charakteristikami imunochemických technik. Studenti se v další části kurzu individuálně zaměří na zpracování vybrané imunochemické techniky, principy a využití. Výběr témat bude buď v souladu s tématem disertační práce, nebo s ohledem na aktuální stav výzkumu v této oblasti. Své poznatky představí v rámci kurzu formou presentace.

Students will be able to:

Understand the function of the immune system, especially with regard to the possibility of influencing the production of antibodies. Parameters of antigen-antibody interaction, the details of the various immunoassay principles.

Studenti budou umět:

Funkce imunitního systému, především s ohledem na možnosti ovlivnění produkce protilátek. Parametry interakce antigen-protilátka, detaily principů jednotlivých imunometod.

Developing and defending a project.

To pass an exam.

Vypracování a obhájení projektu.

Složení ústní zkoušky.

Fukal L., Holubová B.: Imunochemie a imunoanalýza. Praha 2007, ISBN 978-80-239-8903-8 (z)

Daussant J., Desvaux F.X., Introduction to Immunochemical Techniques for Medical Diagnosis, Food Quality Control and Environmental Testing, Praha, 2007, ISBN 978-80-7080-641-8 (z)

Wild D.: The Immunoassay Handbook – Theory and applications of ligand binding, ELISA and related techniques. Elsevier Ltd. 2013, Oxford, UK. ISBN: 978-0-08-097037-0 (d)

Murphy K.: Janewayś ImmunoBiology. GarlandScience New York 2011, ISBN 978-0-8153-4243-4 (d)

Povinná:

• Imunochemie a imunoanalýza, Fukal L., Holubová B., 2007
• Introduction to Immunochemical Techniques for Medical Diagnosis, Food Quality Control and Environmental Testing, Daussant J., Desvaux F.X., 2007

Doporučená:

• The Immunoassay Handbook – Theory and applications of ligand binding, ELISA and related techniques, Wild D, 2013
• Janeway's immunobiology, Murphy, Kenneth, 2012

Lectures will be focused on the basic functions of individual components of immune system; adaptive part of the immune system (interaction of cell components leading to the final production of specific antibodies); characteristics related to the structure and properties of antigens and antibodies; methods of antibody preparation; parameters antigen-antibody interaction in-vitro; haptens and immunoassay; chemical modification of molecules of antigens and antibodies for immunoassays needs; details about principles and procedures of basic immunochemical methods (precipitation vs. non-precipitation methods, methods with a mark vs. without a mark); Enzyme Immunoassay and differences in variations of its arrangement; non-precipitation immunoassay with other marker types (than enzyme); amplification of the label signal per unit of antibody-antigen interaction; principles of multidetection antibody chips, immunosensors including microfluidic arrangements and surface plasma resonance; immunoblotting, immunohistochemical applications (including fluorescence multiplex), fluorescence flow cytometry. Immuno-affinity chromatography, user-friendly immunochemical assay formats.

Part of the course will be devoted to elaboration and presentation of individual professional projects of students.

Přednášky budou postupně zaměřeny na základní funkce jednotlivých složek imunitního systému; adaptivní část imunitního systému (interakce buněčných složek za přítomnosti cizorodého antigenu vedoucí k jeho finální likvidaci); charakteristiky týkající se struktury a vlastností antigenů a protilátek; možnosti přípravy protilátek; parametry interakce antigen-protilátka in-vitro; hapteny a imunoanalýza; chemické modifikace molekul antigenů a protilátek pro potřeby imunoanalýzy; detaily postupů základních imunochemických metod (precipitační-neprecipitační, bez značky-se značkou); enzymová imunoanalýza a rozdíly v jednotlivých variacích jejího uspořádání; neprecipitační imunoanalýza s jinými typy značek (než enzym); možnosti amplifikace signálu na jednotku interakce protilátka-antigen; principy multidetekčních protilátkových čipů, imunosenzorů včetně mikrofluidních uspořádání a povrchové plazmové rezonance; imunoblot, imunohistochemcké aplikace (včetně fluorescenční multiplexové), fluorescenční průtoková cytometrie. Imuno-afinitní chromatografie, uživatelsky přívětivé formáty imunochemických testů.

Součástí předmětu bude vypracování a obhájení individuálních odborných projektů studentů.