Studenti budou umět:

Izolovat DNA a provádět základní manipulace s rekombinantní DNA. Připravovat vektory pro genetickou modifikaci různých typů buněk.

Upravovat a značit DNA, využívat DNA značené sondy pro identifikaci specifických sekvencí.

Modifikovat geny cílenou mutagenezí, připojením sekvencí pro detekci a purifikaci afinitní chromatografií.

Analyzovat produkci heterologních proteinů a izolovat je z různých typů buněk.

Analyzovat proteinové interakce. Připravovat genomové knihovny.

Students will be able to:

Isolate DNA and perform basic manipulations with recombinant DNA. Prepare vectors for genetic modification of various cell types.

Modify and label DNA, apply DNA labeled probes for identification of specific sequences.

Modify genes by directed mutagenesis by directed mutagenesis, extension by sequences for detection and purification by affinity chromatography.

Analyze production of heterologous proteins and isolate them from various cell types.

Analyze protein interactions. Construct gene libraries.

Passing written test with a score exceeding 50% and passing an oral exam

D: Sue Carson, Heather B. Miller, Melissa C. Srougi, D. Scott Witherow: Molecular Biology Techniques A Classroom Laboratory Manual 4th Edition, Elsevier 2019

D: Ruml T., Rumlová M., Pačes V.: Genové inženýrství; VŠCHT Praha 2002

D: Green M. R., Sambrook J., Molecular Cloning: A Laboratory Manual (Fourth Edition); Cold Spring Harbor Laboratory Press 2012

Sue Carson, Heather B. Miller, Melissa C. Srougi, D. Scott Witherow: Molecular Biology Techniques A Classroom Laboratory Manual 4th Edition, Elsevier 2019 - D

D:Green M. R., Sambrook J., Molecular Cloning: A Laboratory Manual (Fourth Edition); Cold Spring Harbor Laboratory Press 2012 - D

Předmět je zakončen písemnou a ústní zkouškou.

1. Zopakování genetických pojmů.

2. Plasmidové a virové vektory, umělé chromosomy.

3. Produkce a izolace DNA, její analýza.

4. Restrikční endonukleasy, mapování genomu,

5. Modifikace nukleových kyselin pro detekci specifických sekvencí.

6. Vysokokapacitní metody sekvenování DNA.

7. Zásady práce s RNA, subtrakční knihovny.

8. Aplikace polymerasové řetězové reakce: modifikace produktů, řízená mutageneze.

9. Produkce proteinů v mikrobiálních buňkách, fúzní proteiny, reportérové geny.

10. Tkáňové kultury a jejich využití pro expresi genů.

11. Princip přípravy transgenních organismů.

12. Detekce produktů genové exprese - metabolické značení, elektroforetické a imunochemické metody.

13. Genové terapie.

14. Metody pro studium interakcí proteinů a nukleových kyselin.

1. Recapitulation of genetic principles.

2. Plasmid and viral vectors, artificial chromosomes.

3. DNA production and isolation, its analysis.

4. Restriction endonucleases, genome mapping,

5. Modification of nucleic acids for detection of specific sequences.

6. High-capacity methods of DNA sequencing.

7. Principles of work with RNA, subtraction libraries.

8. Application of polymerase chain reaction: product modification, controlled mutagenesis.

9. Protein production in microbial cells, fusion proteins, reporter genes.

10. Tissue cultures and their use for gene expression.

11. Principle of transgenic organisms preparation.

12. Detection of gene expression products - metabolic labeling, electrophoretic and immunochemical methods.

13. Gene therapy.

14. Methods for studying protein-nucleic acid interactions.

E-learning VŠCHT Praha - presentace

E-learning VŠCHT Praha - přednášky

E-learning VŠCHT Praha - slide presentations

E-learning VŠCHT Praha - lectures

základní znalosti biochemie, molekulová genetiky a analýzy DNA v rozsahu vyučovaném v bakalářském SP na VŠCHT

Biochemistry

Molecular genetics or Molecular genetics and DNA analysis