Studenti budou umět:

Izolovat DNA a provádět základní manipulace s rekombinantní DNA. Připravovat vektory pro genetickou modifikaci různých typů buněk.

Upravovat a značit DNA, využívat DNA značené sondy pro identifikaci specifických sekvencí.

Modifikovat geny cílenou mutagenezí, připojením sekvencí pro detekci a purifikaci afinitní chromatografií.

Analyzovat produkci heterologních proteinů a izolovat je z různých typů buněk.

Analyzovat proteinové interakce. Připravovat genomové knihovny.

Students will be able to:

Isolate DNA and perform basic manipulations with recombinant DNA. Prepare vectors for genetic modification of various cell types.

Modify and label DNA, apply DNA labeled probes for identification of specific sequences.

Modify genes by directed mutagenesis by directed mutagenesis, extension by sequences for detection and purification by affinity chromatography.

Analyze production of heterologous proteins and isolate them from various cell types.

Analyze protein interactions. Construct gene libraries.

Úspěšné absolvování testu a složení ústní zkoušky

Passing written test with a score exceeding 50% and passing an oral exam

Sue Carson, Heather B. Miller, Melissa C. Srougi, D. Scott Witherow: Molecular Biology Techniques A Classroom Laboratory Manual 4th Edition, Elsevier 2019 - D

D:Green M. R., Sambrook J., Molecular Cloning: A Laboratory Manual (Fourth Edition); Cold Spring Harbor Laboratory Press 2012 - D

Green M. R., Sambrook J., Molecular Cloning: A Laboratory Manual (Fourth Edition); Cold Spring Harbor Laboratory Press 2012

1. Zopakování genetických pojmů.

2. Plasmidové a virové vektory, umělé chromosomy.

3. Produkce a izolace DNA, její analýza.

4. Restrikční endonukleasy, mapování genomu,

5. Modifikace nukleových kyselin pro detekci specifických sekvencí.

6. Vysokokapacitní metody sekvenování DNA.

7. Zásady práce s RNA, subtrakční knihovny.

8. Aplikace polymerasové řetězové reakce: modifikace produktů, řízená mutageneze.

9. Produkce proteinů v mikrobiálních buňkách, fúzní proteiny, reportérové geny.

10. Tkáňové kultury a jejich využití pro expresi genů.

11. Princip přípravy transgenních organismů.

12. Detekce produktů genové exprese - metabolické značení, elektroforetické a imunochemické metody.

13. Metody pro studium interakcí proteinů a nukleových kyselin.

14. Genové terapie.

1. Recapitulation of genetic principles.

2. Bacterial plasmid vectors.

3. Basic operations with DNA.

4. Labeling of nucleic acids and application of probes.

5. Analysis of DNA sequences.

6. Principles of work with RNA.

7. Polymerase chain reaction and its applications.

8. Expression in microbial cells, markers, fusion proteins, reporter genes.

9. Tissue cultures and their use for gene expression.

10. Principle of construction of transgenic organisms.

11. Mutations, directed mutagenesis.

12. Genome mapping, restriction analysis.

13. Product detection - metabolic labeling, electrophoretic and immunochemical methods.

14. Methods for study in protein and nucleic acids interactions.

E-learning VŠCHT Praha - slide presentations

http://biomikro.vscht.cz/vyuka/?Predmet=gieng

Biochemie

Molekulová genetika nebo Molekulová genetika a analýza DNA

Biochemistry

Molecular genetics or Molecular genetics and DNA analysis